震荡速率及提取时间、CO2、滴定终点判定及测定方法对脂肪酸值的影响

三、震荡速率及提取时间

提取时间即为样品加入无水乙醇之后的震荡时间。范维燕等认为，震荡速率对测定结果的影响较大，随着震荡速率的增加，脂肪酸提取率提高。当震荡速率为125r/min 时，样品中的脂肪酸提取基本达到最大值；提取时间对脂肪酸提取率的影响较小，震荡提取10min后，脂肪酸值变化不大。然而庞文禄等认为，同一样品的提取时间越长，所测得的脂肪酸值也越高。在进行脂肪酸提取时，应依据现行脂肪酸值测定标准严格控制提取时间，以保证测定结果的可比性。

目前国标GB/T15684-2015已经将提取方式从振荡器振摇10min改成旋转搅拌1h，采用效率更高的旋转搅拌和更长提取时间来保证更全面地提取游离脂肪酸。

GB/T29405-2012还是采用在振荡器上振摇10min的方法，这种方法应该受粒度、温度等影响会更大一些。

四、CO2

标准滴定溶液为ＫＯＨ－乙醇溶液，所以蒸馏水、空气及被测样品中溶解的CO2 会与其发生作用，增大脂肪酸值测定误差。杨军等认为，未煮沸的蒸馏水对测定结果影响较小， 这是由于测定过程中要扣除空白，可以消除CO2的影响；相反，由于CO2溶于水，所以煮沸后冷却的蒸馏水中的CO2含量不如未煮沸水稳定，进而导致不稳定因素增多。另外，在滴定过程中，加入的碱不断消耗CO2，使溶液中的CO2与空气中的CO2溶解平衡被打破，使滴定时间与CO2的溶解量呈正相关。

有关CO2与脂肪酸值关系的研究有限，不能深刻反映CO2对脂肪酸值的具体影响， 但在测定中，严格执行标准测定方法外，应快速操作、快速滴定，以减少CO2带来的误差。

五、滴定终点判定及测定方法

为克服人为因素对滴定终点的影响，改变滴定终 点判定条件，更加科学、合理的滴定方法成为研究重点。李学青等探讨用活性炭作脱色剂对脂肪酸值测定结果的影响，发现终点色差明显，但活性炭对脂肪酸有吸附作用，造成测定结果偏低。盖泽广以百里酚蓝作指示剂，检测稻谷脂肪酸值，发现颜色变化易于观察，滴定终点易于掌握，检测结果准确。胡小泓等用石油醚和无水乙醇的混合溶剂代替无水乙醇进行脂肪酸值测定，发现滴定终点判断清晰，重复性好。陈无刚根据实际经验介绍滴定终点的判定方式，即接近终点时，出现红色斑块呈油花状向四周散射，加少许水后 中心部位能看见明显的红色，即可判定接近终点。王 平等认为滴定前加入100ml无CO2 蒸馏水（代替50ml），酚酞指示剂 ＰＫ（ＨＩｎ）显色点更容易捕捉，脂肪酸的测定结果更接近实际含量。肖学彬等采用反滴定法，用过量的碱与乙醇提取物中的脂肪酸反应， 再用标准HCl溶液滴定过量的碱液，确认反滴定法结果容易判定、重现性好。范维燕对比仪器法与手工滴定法发现，手工滴定终点滞后，测定结果偏高。李耀等对电位滴定法测定脂肪酸值进 行探讨，以△Ｅ／△Ｖ 的电位突跃判定终点，避免了试样颜色对终点判定的干扰。